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| MBT-24H ( F* ) |
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| * F型は受注生産製品です。 |
| RBT-24H ( F* ) |
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| * F型は受注生産製品です。 |
RBE-12 (PET-12)
RBC-12 (PC-12) |
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BBB
(Zurich) 2010
[PDF-2.15MB] |
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BBB
(Potsdam) 2007
[PDF-652KB] |
CVB 2007
[PDF-1.2MB] |
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第81回日本薬理学会年会
[PDF-1.1MB] |
ポスター
[PDF-368KB] |
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BBBキット™ は、ファーマコセル株式会社と Dr. Mária A. Deli が開発した世界で初めての血液脳関門（Blood-brain barrier: BBB）in vitro 再構成系モデルです。
血液脳関門の構成細胞である脳毛細血管内皮細胞、周皮細胞（ペリサイト）及び星状神経膠細胞（アストロサイト）の3種類の細胞により構成されており、生体内での生理的な BBB 特性を保持しています。BBBキットTM は、基礎研究や薬物の脳内移行性（BBB透過性）検定など幅広く用いることが出来るバイオ製品です。
凍結保存型の完成品をお届けします。ご使用まで-80℃ で冷凍保存ができます。 |
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- 化合物の脳内移行性、化合物（イオン性、小分子･高分子化合物など）の輸送ならびに透過性検定
- バリアー機能ならびに細胞極性： タイトジャンクションたんぱく質の発現・分布、移行たんぱく質の分極分布、レセプター、酵素など
- エンドサイトーシス・トランスサイトーシス研究、化合物・受容体相互作用
- 化合物が血液脳関門に及ぼす影響、受容体の細胞膜局在性、化合物に対する反応性に関する極性研究など
- 共培養の影響：細胞・細胞間、細胞・細胞外基質間の相互作用検定
- 感染細胞研究：ウイルス、細菌、寄生虫などの感染機序等
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脳内移行性検定は、BBBキット™ のインサート内側（血管腔側）に化合物を入れ、一定時間内に内皮細胞及びペリサイトの層を通過し、プレートのウェル内（脳実質側）に漏れでてきた化合物濃度を測定することで行います。
（「薬物脳内移行性検定」をご参照ください。） |
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| タイトジャンクション蛋白の発現と BBBトランスポーターの発現 |
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| ■ |
タイトジャンクション蛋白の発現 |
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| Factor VIII |
ZO-1 |
Claudin-5 |
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| ■ |
BBBトランスポーター |
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BBBキット™ における輸送担体の発現
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24ウェル型 MBT-24 ・ RBT-24 （脳内移行性検定特化型；ポリエチレンテレフタレイト製メンブレンフィルター） と 12ウェル型 RBE-12 （病態モデル・BBB細胞解析用；ポリエステル製メンブレンフィルター、旧PET-12）および RBC-12 （脳内移行性検定型；ポリカーボネイト製メンブレンフィルター、旧PC-12）の製品があります。
| MBT-24・RBT-24 と RBE-12 (PET-12) のインサート・メンブレンフィルターの比較 |
比較表 (1) (PDF-147KB) |
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BBB KitTM MBT-24・RBT-24 |
BBB KitTM RBE-12 |
| 製造元 |
Millipore Corporation |
Corning Incorporated |
| 製品名 |
Millicell® Hanging Cell Culture Insert |
Transwell® Permeable Support |
| カタログ番号 |
#PISP 12R 48
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#3460
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| インサート膜の素材 |
ポリエチレンテレフタレート |
ポリエステル |
| 穴の直径(μm) |
3.0 |
0.4 |
| 膜の直径(mm) |
6.5 |
12 |
| 培養面積(cm2) |
0.33 |
1.12 |
| 血管側の培養液量(μL) |
200/300 |
500 |
| 脳側の培養液量(μL) |
900/1200 |
1500 |
| インサートの高さ(mm) |
16 |
- |
| 穴の密度(pores/cm2) |
2 x 106 |
4 x 106 |
| 膜の厚さ(μm) |
9 |
10 |
| 光学的特性 |
半透明 |
透明 |
| 細胞観察 |
不良 |
良好 |
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Millicell® はMillipore Corporation の登録商標です。
Transwell® はCorning Incorporated の登録商標です。 |
| RBC-12 (PC-12) と RBE-12 (PET-12) のインサート・メンブレンフィルターの比較 |
| 比較表 (2)(PDF-92KB) |
| A |
B |
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| Transwell clear inserts in 12-well plates (A), crossection of the system (B) |
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BBB KitTM RBC-12 |
BBB KitTM RBE-12 |
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Technical data of the polycarbonate （PC ）
membrane Transwell (Corning) inserts: |
Technical data of the polyester （PET ）
membrane Transwell clear (Corning) inserts: |
| 直径 |
12 mm |
12 mm |
| 培養面積 |
1.12 cm2 |
1.12 cm2 |
| 膜の厚さ |
10 µm |
10 µm |
| 穴の直径 |
3.0 µm |
0.4 µm |
| 穴の密度 |
2 x 106 pores/ cm2 |
4 x 10 6 pores/cm 2 |
| 細胞培養 |
可能 |
可能 |
| コーティング |
collagen type IV and fibronectin |
collagen type IV and fibronectin |
| 光学的特性 |
半透明 |
透明 |
| 細胞観察 |
poor |
good |
| インサート内部の培養液量 |
0.5 mL |
0.5 mL |
| プレートウェル内部の培養液量 |
1.5 mL |
1.5 mL |
REFERENCES:
Nakagawa S, Deli MA, Kawaguchi H, Shimizudani T, Shimono T,
Kittel A,
Tanaka K, Niwa M: A new blood-brain barrier model using primary rat brain
endothelial cells, pericytes and astrocytes. Neurochemistry International 54: 253-263, 2009. doi:10.1016/j.neuint.2008.12.002
中川慎介、田中邦彦、田川泰、丹羽正美: 血液脳関門再構成モデルと機能解明への活用. 分子脳血管病 9(3):17-25. 2010
Nakagawa S, Deli MA, Nakao S, Honda M, Hayashi K, Nakaoke R, Kataoka Y, Niwa
M: Pericytes from brain microvessels strengthen the barrier integrity in primary
cultures of rat brain endothelial cells. Cellular and Molecular Neurobiology 27(6):678-694, 2007 Open Access
Deli MA: Blood-brain barrier models. In: Lajtha, A.(Ed.), Handbook of Neurochemistry and Molecular Neurobiology, Neural Membranes and transport. vol. 11, Springer, New York, pp.29-56, 2007
Deli MA, Ábrahám CS, Kataoka Y, Niwa M: Permeability studies on in vitro blood-brain barrier models: Physiology, Pathology, and Pharmacology. Cellular and Molecular Neurobiology 25:59-127, 2005
Hayashi K, Nakao S, Nakaoke R, Nakagawa S, Kitagawa N, Niwa M: Effects of hypoxia on endothelial/pericytic co-culture model of the blood-brain barrier. Regulatory Peptides 123:77-83, 2004
Dohgu S, Takata F, Yamauchi , Nakagawa S, Egawa T, Naito M, Tsuruno T, Sawada Y, Niwa M, Kataoka Y: Brain pericyes contribute to the induction and up-regulation of blood-brain barrier functions through transforming growth factor-β production. Brain Research 1038:208-215, 2005
中川慎介、丹羽正美: 血液脳関門 (BBB). 日本薬理学雑誌 133(3): 170-172, 2009
中川慎介、丹羽正美: 血液脳関門 in vitro 再構成モデル. 日本薬理学雑誌 131(5): 392-393, 2008
中川慎介、丹羽正美: 血液脳関門 (Blood-brain barrier) in vitro 再構成系モデルの開発. バイオインダストリー25(8), 73-82, 2008
Perrière N, Demeuse PH, Garcia E, Regina A., Debray M., Andreux, J-P, Couvreur P, Scherrmann J-M, Temsamani J, Couraud P-O, Deli MA, Roux F: Puromycin-based purification of rat brain capillary endothelial cell cultures. Effect on the expression of blood-brain barrier-specific properties. Journal of Neurochemistry 93:279-289, 2005
Perrière N, Yousif S, Cazaubon S, Chaverot N, Bourasset, F, Cisternino S, Decle`ves X, Hori S, Terasaki T, Deli M, Scherrmann J-M, Temsamani J, Roux F, Couraud P-O: A functional in vitro model of rat blood-brain barrier for molecular analysis of efflux transporters. Brain Research 1150:1-13, 2007
Abbott NJ, Rönnbäck L, Hannson E: Astrocyte-endothelial interactions at the blood–brain barrier. Nature Reviews Neuroscience 7:41-53, 2006
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